ПЦР на гепатит С

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Что такое анализ ПЦР?

Взятие крови из вены

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Виды ПЦР-анализа на гепатит С

молекула ДНК

Различают три вида ПЦР-анализа:

  1. Качественный анализ ПЦР. Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.
  2. Количественный анализ ПЦР. Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.
  3. Генотипирование. Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

Показания к ПЦР-анализу на гепатит С

гепатолог с фонендоскопом

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

  • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
  • положительный результат иммуноферментного анализа;
  • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
  • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
  • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
  • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
  • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
  • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
  • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровка ПЦР-исследования на гепатит С

образцы крови

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

  • Расшифровка качественного анализа.

Обнаружено В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.
Не обнаружено Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.
  • Расшифровка количественного анализа.

Не обнаружено Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.
До 1,8*10^2 МЕ/мл Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.
До 8*10^5 МЕ/мл Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.
Больше 8*10^5 МЕ/мл Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.
Больше 2,4*10^7 МЕ/мл Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.
  • Расшифровка генотипирования.

Обнаружена РНК определенного генотипа В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.
Обнаружена РНК вируса гепатита С В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.
Не обнаружено Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

  • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
  • образец биоматериала был загрязнен;
  • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
  • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Преимущества ПЦР перед другими методами

исследование состояния печени

  1. Диагностика на ранних стадиях. ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.
  2. Низкая вероятность ошибки. В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.
  3. Высокая чувствительность. ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

кровь на исследование ПЦР на гепатит С

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

  • анализ крови сдают с утра;
  • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
  • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
  • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

Источник: https://hepatit.care/hepatits/gepatit-s/ptsr-issledovanie-na-gepatit-s-vidy-pokazaniya-rasshifrovka.html

Расшифровка анализа крови ПЦР на гепатит С

ПЦР на гепатит С – так чаще всего в сокращенном варианте звучит одно из главных исследований в диагностике хронического воспалительного процесса в печени. Применяются различные варианты ПЦР-диагностики, поэтому выбор конкретного исследования делает лечащий доктор. Метод отличается высокой чувствительностью, информативностью и быстротой проведения.

Анализ на гепатит

Что такое ПЦР диагностика?

Анализ ПЦР позволяет определить РНК или ДНК микробного агента в биологической жидкости пациента даже при его минимальной концентрации. Для этого используется специальная аппаратура – амплификатор. Сначала присутствующие в биологической жидкости пациента участки РНК или ДНК многократно копируются – содержание генетического материала возбудителя увеличивается. После этого этапа становится возможной идентификация микробного агента с помощью образца (праймера).

Каждый живой организм обладает уникальной последовательностью нуклеотидов в ДНК или РНК. Отдельные участки могут быть похожи, но именно определение всей структуры в целом позволяет избежать некорректного ответа. Благодаря такому принципу неправильно расшифровать результат ПЦР и, соответственно, поставить ошибочный диагноз невозможно.

Использование полимеразной цепной реакции (ПЦР) предполагает не только идентификацию возбудителя, но и динамику его репликации. В диагностике HCV-инфекции (гепатита С) в режиме реального времени оценивается количество копий вируса – так называемая вирусная нагрузка.

Характеристики гепатитов

Преимущества и недостатки метода лабораторной диагностики

ПЦР-диагностика в практическом здравоохранении рассматривается как одна из наиболее информативных и удобных благодаря следующим особенностям:

  • быстрота проведения – всего 2-3 часа (редко больше) и готов окончательный результат;
  • удобство — не требуется особенной подготовки для пациента перед забором биологической жидкости;
  • достоверность и специфичность – практически исключены ложные ответы, так как подобраны праймеры (образцы) для большинства известных микроорганизмов;
  • универсальность – если есть праймер, то идентифицирован будет любой возбудитель, даже вирус небольших размеров или внутриклеточно расположенный паразит, даже если количество микробного агента невелико;
  • информативность – определяется факт наличия возбудителя в биологической жидкости пациента, а не иммунологические реакции организма в ответ на проникновение микробного агента.

ПЦР-диагностика является наиболее современным и перспективным методом диагностики вирусных гепатитов и другой инфекционной патологии, постепенно вытесняет классический бактериологический, серологический и вирусологический метод. Иммуноферментный анализ определяет антитела (иммуноглобулины) определенных классов, поэтому может быть применен как дополнение к молекулярно-генетическим методикам выявления вируса.Схема диагностики гепатита C

Недостатки ПЦР-диагностики немногочисленны:

  • высокая стоимость исследования – минимальный пакет только молекулярно-генетических исследований, необходимый при гепатите С стоит порядка 5000 российских рублей, а необходимы и другие тесты;
  • определенное оснащение лабораторного комплекса – ПЦР осуществляет только квалифицированный сотрудник на дорогостоящем амплификаторе;
  • ограниченная недоступность исследования для пациентов, так как амплификаторы могут позволить приобрести только крупные лабораторные центры;
  • техническая погрешность – при использовании низкочувствительной (низкого качества) тест-системы или праймера возможны ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Виды анализа на гепатит C методом ПЦР

Анализы крови для полноценной диагностики гепатита С предполагает несколько исследований. К ним относится: качественный анализ, количественный, генотипирование и определение аллельного полиморфизма генов некоторых ферментов и цитокинов.

Виды генетической диагностики

Качественный анализ является первым и самым главным, так как проводится определение наличия возбудителя или его отсутствие в крови пациента. Это исследование делается при первичном обследовании для подтверждения диагноза, а также после окончания курса противовирусной терапии, чтобы показать эффективность лечения и факт полного выздоровления пациента.

Количественный анализ – это так называемая вирусная нагрузка. В режиме реального времени подсчитывается количество вируса (копий вирусных частиц) в 1 мкл крови пациента. Показатель вирусной нагрузки отражает активность размножения возбудителя гепатита С и активность патологического процесса. В результате применения противовирусных препаратов вирусная нагрузка снижается, после завершения полного курса терапии исчезает. Проведение количественного анализа при отрицательном результате качественного нецелесообразно.

Применение диагностических тест-систем позволяет с высокой точностью определить показатель вирусной нагрузки. В прайс-листах лабораторных комплексов этот вариант указывается как ультрачувствительный метод. Его преимущество – высокая точность, но и с ней же связан главный недостаток – высокая цена.

Генотипирование вируса – это идентификация определенного генотипа возбудителя гепатита С. В мире известно 6 генотипов вируса гепатита С. Эта информация важна для выбора правильного противовирусного лечения, так как не все препараты одинаково эффективны в отношении различных генотипов. Генотипирование проводится однократно, повторные тесты нецелесообразны, так как генотип вируса не меняется.

Определение аллельного полиморфизма генов – новейшая методика, которая предполагает изучение генотипа пациента с целью прогнозирования возможных результатов на определенный вариант лечения, скорость развития цирроза печени и других исходов болезни. Например, изучается полиморфизм интерлейкина IL 28, генотип ТТ ассоциируется с хорошим результатом противовирусного лечения интерфероном. Это исследование также проводится однократно, так как геном хозяина не меняется.

Показания к проведению исследования

Показанием к проведению исследования является подтверждение диагноза гепатита С или его исключение. Если пациент с подтвержденным диагнозом хронического гепатита С начинает противовирусную терапию, то перед этим необходимо определить уровень вирусной нагрузки.

Лабораторные исследования при гепатите C

Когда заканчивается 1 месяц такой терапии уровень вирусной нагрузки определяется повторно, снижение этого показателя отражает эффективность назначенных лекарственных средств. Если уровень вирусной нагрузки остается прежним или увеличивается, то нецелесообразно продолжать прием назначенных медикаментов ввиду их неэффективности, пациент нуждается в выборе других противовирусных препаратов.

После завершения курса противовирусного лечения пациенту назначается качественный анализ ПЦР, чтобы подтвердить полную элиминацию вируса из организма.

  • Если в крови все-таки обнаруживается вирус гепатита С, то еще раз оценивают уровень вирусной нагрузки.
  • Если качественный анализ отрицательный, то количественный анализ не нужен.

Как подготовиться к сдаче анализа

Специальной подготовки для проведения ПЦР-диагностики не требуется. Большинство лабораторий указывает только общие для всех биохимических и серологических тестов требования:

  • накануне взятия крови пациенту следует прекратить прием лекарственных средств, в первую очередь, гормональных, изменяющих реологические свойства крови, при невозможности отмены – предупредить об этом лечащего доктора и лабораторного сотрудника;
  • последний прием пищи необходимо осуществить за 8-10 часов до посещения лаборатории;
  • взятие крови для ПЦР-диагностики предпочтительно запланировать на первую половину дня;
  • в день забора крови допускается только употребление умеренного количества воды, но не пищи – исследуется только кровь натощак.

Скорость получения результатов зависит от загруженности лабораторного комплекса и от того, как далеко транспортируется взятый биологический материал. Прайс-лист лаборатории обычно указывает количество дней, в течение которых готовится исследование.

Расшифровка результатов

Результат только ПЦР-диагностики не несет исчерпывающей информации (норма или патология), его необходимо оценивать в комплексе с биохимическими и серологическими тестами. Только комплексный подход позволяет правильно оценить активность патологического процесса и необходимость назначения противовирусной терапии.

Качественный анализ

Оценка результатов качественного ПЦР-анализа на вирус гепатита С проста. Возможно всего 2 варианта:

  • отрицательный (РНК вируса гепатита С не обнаружена) – гепатита С нет, дальнейшее обследование на этот гепатит не требуется;
  • положительный (РНК вируса гепатита С обнаружена) – поражение печени есть, необходимы другие тесты для установления активности патологического процесса и принятия решения о необходимости противовирусной терапии.

Какие еще тесты необходимы, расскажет лечащий доктор.

Качественное исследование

Количественный анализ

Количественный показатель (он же вирусная нагрузка) определяется при первичном обследовании пациента для установления активности патологического процесса. Чем выше этот показатель, тем выше активность процесса, тем более необходима пациенту специфическая терапия. В среднем результат качественного анализа можно расценивать следующим образом:

  • более 800 × 10копий – показатель вирусной нагрузки высокий, с большой вероятностью пациенту потребуется противовирусная терапия;
  • менее 800 × 10копий – показатель вирусной нагрузки низкий, необходимость специфического лечения оценивается по результатам других тестов (качественный ПЦР и биохимия – функциональные пробы печени);
  • вирусная нагрузка не определяется – репликации вируса гепатита С нет, идеальный результат после завершения курса противовирусной терапии.

Различные лаборатории могут указывать другие диапазоны высокого и низкого уровня количественного анализа ПЦР. Как расшифровывается результат обследования конкретного пациента, следует спрашивать у лечащего доктора.

Количественный анализ ПЦР

Генотипирование

Результаты генотипирования – определения генотипа вируса гепатита С – однозначны. Всего известно 6 генотипов вируса – 1, 2, 3, 4, 5, 6. В РФ чаще всего обнаруживаются 1 и 3 генотипы, несколько реже 2 и 4. Генотипы 5 и 6 регистрируются преимущественно в африканских странах.

Информация о генотипе необходима для правильного выбора специфических противовирусных средств, так как определенные лекарственные субстанции эффективны в отношении только определенного генотипа вируса.

Анализ на генотипирование

ИФА положительный, а ПЦР отрицательный на гепатит С

ИФА – иммуноферментный анализ определяет антитела к вирусу гепатита С. Это могут быть острофазные антитела (иммуноглобулины класса М) или суммарные (иммуноглобулины класса М и G).

Возможен вариант, когда ИФА положительный (обнаружены суммарные антитела к вирусу гепатита С), а ПЦР отрицательный. Такой результат свидетельствует о том, что пациент перенес гепатит С (острый или хронический), но размножения вируса нет. Противовирусное лечение такому пациенту не показано.

Заключение

ПЦР-диагностика вирусного гепатита С достаточно сложна, так как включает несколько показателей. Учитывая необходимость комплексного подхода в обследовании пациента, расшифровку всех исследований необходимо осуществлять лечащему врачу.

Источник:https://ogepatite.ru/c/pczr-diagnostika.html

Качественный и количественный анализ ПЦР на гепатит С: отрицательный, положительный, расшифровка

Гепатит С является болезнь с вирусной этиологией, которая поражает печень. Провоцирует данное состояние вирус HCV с РНК-молекулой. Наличие этой кислоты дает возможность делать анализ ПЦР на гепатит С.

Качественный и количественный анализ ПЦР на гепатит С

Опасность рассматриваемого заболевания в том, что период между попаданием вируса в организм и появлением первых симптомов может быть довольно длительным — от 1-2 до 4-5 недель. Это мешает выявить заболевания и начать терапию своевременно.

Зависимо от особенностей организма носителя вируса заболевание может протекать остро, а также приобретать хроническую форму, которая требуется затратного и продолжительного по времени лечения. Если обнаруживаются вирусные частицы гепатита С, то пациента назначаются необходимые анализы, одним из которых есть ПЦР на гепатит С. Этот анализ проводится абсолютно всем лицам, у кого были обнаружена антитела к вирусу.

Анализ крови поможет доктору определить наличие или отсутствие вируса гепатита С в организме пациента. Данный показателя определяют количество вируса, который поразил организм, а также его генотип и характеристики.

На основе полученных результатов после проведения данного анализа, а также ссылаясь на дополнительное проведенные исследования специалист определяет продолжительность лечения, и степень угрозы пациента для здоровья других людей.

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатит С имеет и другое название — РНК-анализ. Такое название объясняется тем, что в вирусе присутствует частичка РНК. Этот микроорганизм способен мутировать.

Все генотипы вируса характеризуются дифференциальной резистентностью, именно поэтому каждому пациенту назначаются разные методы терапии и в каждом индивидуальном случае дальнейший прогноз может отличаться.

РНК-анализ на гепатит С

В качестве исследуемого материала выступает кровь из вены. ЕЕ нужно сделать на голодный желудок. Обычно тестирование осуществляется методом Real-Time PCR, но также может использоваться тест COBAS AMPLICOR. В не зависимости от выбранного типа исследования крайне важно учесть порог чувствительности, то есть возможность реагента определить саму малую концентрацию вирусных частиц в крови.

Если показатели нормальные, то в расшифровке теста будет указано «не найдено».

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

Составляющие анализа:

  • количественный анализ;
  • качественный;
  • генотропирование.

Благодаря тесту можно выявить генетику вирусной инфекции, а также стадию его развития в организме пациента. В зависимости от того, насколько система диагностики чувствительна, анализ моет проводиться либо один раз либо несколько — для подтверждения результата, используя более чувствительный реагент.

Качественный ПЦР гепатита С

Качественный ПЦР гепатита С

Рассматриваемый анализ также может называть анализ ПЦР на гепатит С качественный. Обычный уровень чувствительности теста, который позволяет определить присутствие вируса — от 10 до 500 МЕ.

При отрицательных показателях можно говорить о том, что уровень вируса в крови пациента значительно меньше порога чувствительности теста.

В случае, если результаты тестов ничего не показали, доктору необходимо немного больше узнать о пороге чувствительности пациента.

Тест может определить наличие вируса в организме пациента примерно через неделю после инфицирования.

Количественный ПЦР гепатита С

Благодаря подобному исследованию можно узнать количество РНК флавивируса присутствует в организме человека. Он определяет, сколько вирусного РНК есть на 1 кубическом см крови. Результаты анализов расшифруются в МЕ на мл.

Количественную диагностику ПРЦ следует проводить прежде чем назначать лечебную терапию, ну и конечно же после проведенных процедур, примерно на 12 недели лечения. Данная процедура необходима для того, чтобы удостоверится в правильности лечебной терапии. Вирусная нагрузка дает возможность определить 3 главных показателя болезни:

  • продолжительность и прогноз противовирусного лечения (чем большей будет вирусная нагрузка, тем длительней будет терапевтический курс);
  • эффективность, а также метод терапии;
  • инфекционность, то есть степень риска передачи вируса от зараженного человека к здоровому.

Данный вид диагностики зависит от вида лабораторного теста, а также от порога чувствительности.

Количественный ПЦР гепатита С

Генотропирование

Так как HCV имеет высокую активность в плане мутации, при проведении теста необходимо определить, какой генотип вируса присутствует у больного в крови. Существует 11 генотипов вируса гепатита С, они также делятся на разные субтипы.

Следует помнить о том, что данный этап анализа крайне важен, потому что благодаря нему доктор может сделать выводы об фазе вируса, назначить подходящее лечение, а также выписать пациенту наиболее эффективные препараты.

Различные генотипы HCV поддаются лечению по-разному. К примеру, чтобы вылечить первый генотип потребуется более года, а эффективность такой терапии примерно 65%. А вот генотип 2 и 3 можно вылечить за полгода, при этом эффективность терапии значительно выше — примерно 90%.

Также следует отметить, что благодаря генотипироанию можно также понять, в каком состоянии находится печень. К примеру, часто генотип 3 протекает совместно с стеатозом, который способствует накоплению жира в клетках печени.

Анализ крови на ПРЦ способен определить генотип заболевания. В некоторых случаях тестовые системы не могут определить вирус. В таком случае можно получить результат «не типируется». Подобный результат анализов говорит о том, что генотип вируса не характерен для определенной территории. В подобных случаях нужно провести повторные анализы но уже с высшим пороком чувствительности.

Генотропирование

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Вся расшифровка анализов основана на сведениях полученных ранее. Благодаря лабораторным исследованиям в большинстве случаев обозначаются такие данные:

  • тест обычно называется Real-time;
  • обозначается цифра генотипа;
  • к-во фракций с РНК;
  • найдено или не найдено.

Самым важным при расшифровке данного анализа есть пункт под номером 3. Он позволяет увидеть вирусную нагрузку, от которой зависит продолжительность лечебных процедур, и дальней шее состояния пациента, а также его время его выздоровления.

Результаты исследований показывают цифру генотипа а также иногда можно увидеть латинскую букву, которая является определителем субгенотипа вируса. Чтобы доктор мог поставить правильный диагноз и назначить лечение ему необходимо знать генотип заболевания, этого будет достаточно для проведения дальнейших действий.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для того, чтобы расшифровать анализы, надобно обратиться к таким специалистам — инфекционисту либо гепатологу. Эти доктора смогут расшифровать полученные данные. В основном расшифровка результатов анализа крови, да и вообще любых анализов, для человека без медицинского образования, совершенно непонятны.

К примеру, при отрицательном тесте на гепатит, и ИФА положительном, смело можно утверждать об отсутствии у пациента НСВ, но это не исключает того, что гепатит С пациент перенес намного раньше, при чем в острой форме.

Считается, что положительный ИФА говорит, о том, что в кровяном русле обнаружены антитела, произведенные после того, как вирус был в прошлом поражен. Однако в нынешней медицине этот анализ не считают достаточно надежным. Доктора его используют исключительно в качестве первичного скрининга. При диагностике болезни доктора отталкиваются от показателей ПЦР-тестов.

Выводы

Чтобы сделать анализ ПЦР используется кровь из вены. Обычно делают двойной забор биоматериала — для теста ПЦР и для ИФА. Чтобы результаты были точными и достоверными, нужно соблюдать некоторые правила забора биоматериала:

  • между употреблением еды и забором биоматериала должен быть выдержан временной промежуток — не меньше 8 часов;
  • кровь нужно сдавать на голодный желудок, в первой половине дня;
  • на протяжении суток перед анализом нужно отказаться от интенсивных физнагрузок;
  • перед тем, как сдавать анализ, надобно отказаться от употребления жареной еды и от питья спиртного.

Готовые результаты можно забрать на следующий день.

Источник:  https://nebolet.com/med-analizy/kachestvennyj-i-kolichestvennyj-analiz-pcr-na-gepatit-c-otricatelnyj-polozhitelnyj-rasshifrovka.html

Анализ ПЦР на HCV, виды: отрицательный, положительный  и расшифровка

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на гепатит С — определяет причину появления РНК вируса в организме человека.

Что такое ПЦР и РНК анализ крови?

Способ диагностики вируса — ПЦР или его еще называют РНК анализом — очень молод, пока что он насчитывает десятилетия. Но не смотря на такой короткий промежуток времени, он сумел зарекомендовать себя с положительной стороны.Результат анализа ПЦР на гепатит С бывает нескольких видов: отрицательный и положительный. Отрицательный — показывает отсутствие вируса в крови, а положительный — свидетельствует о наличие в крови РНК гепатита С.

Кровь для данного исследования сдается из вены и натощак, желательно в период с 08:00 до 11:00. Тестируется высокочувствительным режимом “Real-tima PCR” — 14 МЕ/мл, что позволяет получить более точный результат.

Виды ПЦР анализов и их стоимость

Диагностика гепатита С  (ПЦР) делится на три вида:

  • качественный — наработка схемы РНК (цепная реакция).
  • количественный — установление нагрузки вируса на организм человека.
  • генотипированный — определение типа вируса.

Количественный

Количественный — это отражение уровня концентрации РНК инфекции в крови больного.Чаще всего врачи назначают его перед проведением терапевтического лечения для выяснения полной картины болезни. Самой информативной для докторов является 12 неделя заболевания. Именно на ней можно определить — эффективно ли проводимое лечение или есть ли болезнь или нет.

Полученные результаты интерпретирует лечащий врач. Показатели начинают определяться при 8х5 МЕ/мл — при этом в организме отмечает не менее 3х6 копий на 1 мм крови.

Бывают случаи, когда лаборатории не удается подсчитать РНК, и тогда результат пишется так: “ниже измерительного диапазона”.

СТоимость проводимого исследования колеблется от 350 до 5 000 рублей. Цена напрямую зависит от применяемых в исследовании реактивов.

Стоит отметить, что прямой связи концентрации инфекции в крови (HCV RNA) со степенью болезни нет.

Данный метод помогает установить:

  • эффективность выбранного лечения и ее тот или иной метод,
  • продолжительность болезни, установление диагноза и прогноза на лечение и дальнейшую жизнь,
  • степень опасности, при которой больной является переносчиком болезни, например, при ПА (половом акте).

Встречаются такие случаи, когда у пациента отмечается высокая степень инфекционной нагрузки, но при этом у него нет поражения клеток жизненно важного органа.

Качественный

Качественный анализ — это результат изучения полимеразной цепной реакции болезни. Стандартные показатели вирусной отметки колеблются от 10 до 500 МЕмл. Если после прохождения исследования отмечается отрицательный показатель вирусной нагрузки, то процент концентрации инфекции в крови пациента находится ниже нормы. Если же Вы получили результат “не обнаружено”, то следует через 10 дней повторить обследование, так как у каждого человека может быть свой порог чувствительности. Важно, проводить исследование в одной и той же лаборатории. Так как от этого тоже зависит результат.

Если Вы заразились гепатитом С, то данный анализ покажет “обнаружено” уже через 4-6 дней после заражения. А вот для проведения количественного анализа — пока рано, так как может быть ложно-отрицательный результат.

Генотипирование

Анализы позволяют на довольно-таки ранних сроках выявить разновидность генотипа инфекции, находящегося в крови пациента. В медицинской практике выявлено 11 генотипов. Также ПЦР помогает лечащему врачу установить устойчивость и непоколебимость вируса к применяемому методу лечения, то есть определить форму мутации болезни. Все это нужно для того, чтобы доктор мог назначить правильное лечение, так как один генотип требует 48 дневной терапии, а другие — всего 20 дней. Бывают случаи, когда лаборатории не могут определить тип болезни и пишут “не типируется”, то есть в человеке присутствует вирус, который не совпадает с представленными в данной лаборатории видами гепатита С. В таком случае лучше пересдать анализ в другой лаборатории с более чувствительной аппаратурой.

Расшифровка

Для того чтобы расшифровать результаты полученных исследований, лучше обратиться к своему лечащему врачу, так как знания показателей нормы в данном вопросе не достаточно. Например: слова “анализ ПЦР гепатит С не обнаружено” или  “найдено/обнаружено” мы можем понять, а вот в какой степени находится болезнь, и при каком типе гепатита С, увы, нет.

Также в полученном результате может быть написано следующее:

  • наименование проводимого теста, чаще всего пишут: “Real-time”.
  • диапазон, устанавливающий наличие болезни,
  • генотип заболевания — 1, 2…, который может обозначаться с буквой, например, генотип 3а.
  • объем РНК, присутствующий в крови, например, 831,6 МЕ/мл.

Врачи всегда обращают особое внимание на пункт определения вирусной нагрузки болезни. Так как именно данный показатель делает прогноз на будущее и помогает определиться с методом лечения.

Отрицательный ПЦР при положительном ИФА

Бывает пациенты задают вопрос: “ У меня антитела гепатита С есть, а ПЦР отрицательный? Почему так?” Это происходит за счет того, что анализ был проведен некачественно или с несоблюдением некоторых правил: например, употребление накануне данного метода диагностики лекарственных средств.

Встречается, но редко, когда пациент получает ложный результат. Это происходит по причине несоблюдения некоторых правил пациентом или лабораторией. Также бывает и такое, когда анализ на ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Это свидетельствует о том, что в крови больного не обнаружено HCV, но до этого в организме был вирус в острой форме. Но это случается ещё реже. Тем более при интерпретации полученных результатов, врачи ориентируются на показатель ПЦР.

Показания к анализам и где их делать

При необходимости проверить факт наличия инфекции или проверить эффективность лечения этой болезни, то следует провести качественный и количественный анализ. Благодаря им врачи могут с точностью определить правильность своих действий, направленных на выздоровление пациента.

Анализ на ПЦР можно пройти в любой лаборатории платно и бесплатно. Главное, если появляется необходимость пройти повторное исследование, не относящееся к ложно-отрицательному результату, лучше всего обследоваться в одной лаборатории, так как у каждой установлены свои нормативные границы, которые могут запутать лечащего врача. Что в свою очередь может привести к назначению неправильного метода лечения и увеличению времени выздоровления.

Источник: https://medinfo.club/ptsr-na-gepatit-s/

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА ПЦР НА ГЕПАТИТ С И РАСШИФРОВКА РЕЗУЛЬТАТОВ

Внимание! Информация представлена в ознакомительных целях и не является руководством к действию. Не занимайтесь самолечением, сначала проконсультируйтесь с врачом.

Суть диагностики

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

  • праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
  • специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Виды исследования

Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

  • генотипирование;
  • качественный;
  • количественный.

Качественный метод

Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

Количественный метод

Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

Генотипирование

Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

Достоинства анализа ПЦР на гепатит

Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

  1. Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
  2. Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
  3. Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

Показания к проведению

Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

  • наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
  • симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
  • положительные результаты ИФА;
  • увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
  • необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
  • проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
  • проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
  • наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

  • забор крови проводится утром;
  • анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
  • за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
  • за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

Результаты анализа: нормы и отклонения

Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

  • биохимического анализа крови;
  • данные ультразвукового исследования;
  • результаты биопсии.

Расшифровка количественного анализа

При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

Показатель Характеристика
Не обнаружено Норма здорового человека.Данный показатель обозначает, что в организме человека не присутствует генетический материал вируса или его концентрация ниже порога чувствительности.
До 1,8*10^2 МЕ/мл Значение подобных результатов изучается с повышенной осторожностью, так как необходимо соотношение информации с другими видами диагностирования. Такой результат требует повторного проведения процедуры, ввиду того, что концентрация РНК возбудителя ниже порога количественного определения.
До 8*10^5 МЕ/мл Вирусная нагрузка данного параметра считается низкой. Снижение концентрации вируса говорит о том, что лечебные мероприятия проводятся эффективно.
Больше 8*10^5 МЕ/мл Высокая вирусная нагрузка, следует пересмотреть подход к лечению.
Больше 2,4*10^7 МЕ/мл В этом случае концентрация РНК возбудителя достигает запредельных отметок, поэтому делать выводы об уровне вирусной нагрузке нет смысла. Чаще всего при таком результате назначается повторный тест с разведение частиц крови.

Расшифровка качественного анализа

В заключении качественного анализа ПЦР на гепатит С могут присутствовать следующие данные:

Показатель Характеристика
Обнаружено Если зафиксирован положительный ответ, это значит, что в исследуемом образце крови присутствует генетический материал вируса. Простыми словами – подтверждается факт заражения человека.
Не обнаружено Если в конечном итоге выходит отрицательный ответ, значит, заражение не произошло или количество РНК вируса недостаточно для определения чувствительности.

Расшифровка генотипирования

При получении анализов на генотипирование вируса можно обнаружить следующие варианты показателей:

Показатель Характеристика
Обнаружена РНК конкретного генотипа Данный результат показывает то, что в биологическом материале пациента найден вирус гепатита С конкретного генотипа и субтипа. Обозначается каждый генотип цифрой и латинской буквой.
Обнаружена РНК вируса гепатита С При подобных результатах назначается повторное исследование, так как данный параметр обозначает наличие вируса гепатита, который не относится к 1,2,3 типу. Подобные случаи считаются редкими в России.
Не обнаружено Данный результат считается нормой и свидетельствует о том, что человек здоров или концентрация вируса ниже порога определения.

Ложноположительные и ложноотрицальные результаты

Ложно положительные и ложноотрицательные результаты ПЦР исследования получаются в таких случаях:

  • при недостаточной квалификации медицинского персонала, которые проводят диагностику;
  • ошибки в работе лаборантов, когда кровь транспортируется в лабораторию ненадлежащим способом или биоматериал загрязнён;
  • случаи ненамеренной подмены проб крови;
  • нарушения в процессе подготовки биологического материала;
  • воздействие на исследуемые образцы повышенной температурой.

Среди других причин получения неточных результатов выделяют такие:

  • кровь пациента содержит остаточные частицы гепарина и прочих коагулянтов;
  • в образце присутствуют вещества-ингибиторы, способствующие замедлению или остановке полимеразной цепной реакции.

Где сделать ПЦР-диагностику и сколько стоит?

Подобные исследования проводятся:

  • в частных медицинских центрах;
  • в КДВ;
  • в государственных поликлиниках.

Государственные поликлинники проводят анализ ПЦР на гепатит С бесплатно на основаниях наличия у пациента направления от гепатолога или инфекциониста.

Диагностика заболевания на платной основе проводится во всех крупных городах России.

Стоимость диагностики зависит от:

  • качества оборудования клиники;
  • скорость выполнения работы;
  • типа теста.

Цена на изучение крови методом ПЦР колеблется в следующих пределах:

  • качественный ПЦР анализ — 600-900 рублей (в Москве и Санкт-Петербурге);
  • качественный ПЦР анализ — 300-800 рублей (регионы);
  • определение вирусной нагрузки — 17000-22000;
  • определение других видов инфекции количественного анализа 1200-10000 рублей.

Источник: https://hromosoma.com/dnk/ptsr-gepatit-c-11874/

Ссылка на основную публикацию